“心肌样”环境诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究
作者：世代 文章来源：互联网 点击数： 更新时间：2008-2-29
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【作者】
汪蕾
【导师】
林国生
【学位授予单位】
武汉大学
【学科专业名称】
内科学
【论文级别】
硕士
【出版时间】
2005-4-5
【关键词】
内科学论文,医药学论文
【中文摘要】
本文目的是将心肌细胞与骨髓间充质干细胞(MSCs)在体外混合培养来模拟MSCs所处的“心肌样”环境，探讨“心肌样”环境下影响MSCs分化为心肌细胞的相关因素及其机制。 方法：制备MSCs：采用SD大鼠作为实验动物，用离心法分离全骨髓，经Percoll液密度梯度离心以及贴壁培养技术分离MSCs后用荧光染料4，6-二乙酰基-2-苯基吲哚(4，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI)标记细胞。制备心肌细胞：取初生1～2d的SD大鼠心脏组织，剪碎后反复消化得到心肌细胞，培养2天后用于实验。将两种细胞分别在不同条件下进行培养和混合培养：1.普通培养基培养MSCs；2.DAPI-MSCs和搏动的心肌细胞分别以1：1，1：2，2：1的比率接种形成混合培养；3.心肌细胞条件培养液孵育MSCs；4.加入异搏定充分抑制心肌细胞搏动后与MSCs混合培养。连续5天利用显微镜观察MSCs的生长行为。从第4天开始对各组的细胞爬片进行心肌肌钙蛋白T免疫荧光染色并计算MSCs的分化率。 研究表明：1.MSCs可以在体外“心肌样”环境中分化为心肌细胞。 2.心肌细胞与MSCs之间的直接接触是MSCs定向分化为心肌细胞的必要条件。缺乏直接接触条件下，心肌细胞条件培养液提供的单纯心肌细胞外环境没有诱导作用。 3.心肌细胞与MSCs之间的电机械刺激是MSCs定向分化为心肌细胞的必要条件，异搏定充分抑制心肌细胞的搏动后MSCs亦停止了分化。
【全文价格】
12 Lw币
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